謝獻勝 $ ，周新民 2 ，王 鋒 ’!

（ $< 江蘇畜牧獸醫職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇泰州 22;’33 ；

2< 中國農業(yè)科學(xué)院家禽研究所，江蘇揚州 22;33’ ； ’< 南京農業(yè)大學(xué)動(dòng)科院，江蘇南京 2$33&; ）

卵黃抗體（ !"# ）指從免疫禽蛋中提取出的針對特定抗原的抗體。自 $%&’ 年 ()*+,*-*- 首次報道雞蛋中存在抗體以來(lái)，卵黃抗體的研究不斷深入，目前在卵黃抗體的形成、生物學(xué)特性等方面已研究得比較清楚，并且卵黃抗體作為診斷試劑和防治藥物的研究愈來(lái)愈受到關(guān)注。本文就免疫雞卵黃抗體的研究進(jìn)展作一綜述。

1.卵黃抗體的形成

禽類(lèi)的免疫系統包括細胞免疫和體液免疫，分別受胸腺和法氏囊的控制。當機體受到外來(lái)抗原刺激后，法氏囊內的 . 細胞分化成為漿細胞，分泌特異性抗體進(jìn)入血液循環(huán)，當血液流經(jīng)卵巢時(shí)，特異性抗體（主要是 !"/ ）在卵細胞中逐漸蓄積，形成卵黃抗體；當卵細胞分泌進(jìn)入輸卵管時(shí)，流經(jīng)輸卵管的血液中含有的特異性抗體（主要是IgA和 IgM ）進(jìn)入卵清中，形成卵清抗體。 !"/ 移行進(jìn)入卵細胞是受體作用的結果，因而 可在卵細胞中大量蓄積，濃度高于血液中的 !"/ 。與卵黃抗體相比，卵細胞在輸卵管中移行的時(shí)間較短，因而卵清抗體含量極微。卵黃抗體在禽胚孵化過(guò)程中逐漸進(jìn)入禽胚血液，為剛出殼雛雞提供被動(dòng)免疫保護，在雛雞疾病預防中具有重要作用，但同時(shí)也會(huì )干擾雞疫苗的免疫效果。

2IgY的性質(zhì)

!IgY 的性質(zhì)與哺乳動(dòng)物的 !"/ 相似。正常雞 的分子量約為 $%3(45 ，由兩條輕鏈（ 26 ）和兩條重鏈（27 ）組成，分子量分別為 839:3(45 和 229’3(45 。其等電點(diǎn)約為 ;<2 。

!"# 與一般哺乳動(dòng)物 !"/ 相比， !"# 具有較強的耐熱、耐酸、抗離子強度和一定的抗酶降解能力。在低于 :;= 條件下， !"# 具有良好的熱穩定性。!"# 制劑在 >= 貯存 ; 年或在室溫貯存 8 個(gè)月其活性仍無(wú)明顯變化或下降， 8;= 時(shí)可保持 2>? 以上， :3=時(shí)加熱 &3+@A 后其活性才明顯下降， 83= ， ’3+@A 條件下巴氏消毒不影響 !"# ；高于 %3= ，大部分 !"# 失去活性。!"# 在 ,7><39$$<3 時(shí)比較穩定， ,7’<39’<; 時(shí)活性迅速下降， ,7$2 時(shí)活性亦有所下降。!"# 對胃蛋白酶有較高的抵抗力，但對胰蛋白酶十分敏感。將胃蛋白酶和 !"# 在 ,72<3 溫育 $? 后，幾乎所有活性喪失，但在 ,7><3 時(shí) $? 后可保持 &$B 的活性，甚至溫育 $3? 后仍有 8’B 活性。 !"# 分別與胰蛋白酶和胰凝乳酶溫育 %? ，活性分別保持 ’&B 和 >$B ?！?!"#%*+,-特定病原菌的卵黃抗體能直接黏附于病原菌的細胞壁上，改變病原細胞的完整性，直接抑制病原菌的生長(cháng)；卵黃抗體可黏附于細菌的菌毛上，使之不能黏附于腸道黏膜上皮細胞；一部分卵黃抗體在腸道消化酶作用下，降解為可結合片段，這些片段含有抗體的可變小肽（ C5D ）部分，這些小肽很容易被腸道吸收，進(jìn)入血液后能與特定的病原菌黏附因子結合，使病原菌不能黏附易感細胞而失去致病性，而 !"# 的穩定區（ C* 部分）留在腸內。
> !"#./01234

卵黃中的主要成分是蛋白質(zhì)和脂肪，其比例為$E2 。大部分蛋白質(zhì)都是脂蛋白，存在于卵黃顆粒中，不溶于水，只有卵黃球蛋白（ ! 、 " 、 # ）是水溶性的，而!"# 是 # 卵黃球蛋白。因此 !"# 的分離純化首先需要有效地去除卵黃中的脂類(lèi)，從水溶性蛋白中分離 !"# 。多年來(lái)，已建立了許多較為高效而經(jīng)濟的方法，這些方法大多以 FG/ 、硫酸葡聚糖、天然膠，如

免 疫 雞 卵 黃 抗 體 研 究 進(jìn) 展謝獻勝 $ ，周新民 2 ，王 鋒 ’!

（ $< 江蘇畜牧獸醫職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇泰州 22;’33 ；

2< 中國農業(yè)科學(xué)院家禽研究所，江蘇揚州 22;33’ ； ’< 南京農業(yè)大學(xué)動(dòng)科院，江蘇南京 2$33&; ）

收稿日期： 233;H3$H$:

! 通訊作者

>$ H H

DOI:10.16372/j.issn.1004-6364.2005.10.020

中國家禽

!""# 年第 !$ 卷第 %" 期 !"#$% &’()*+, -’)./012’.34./445

藻酸鈉、角叉聚糖或乙醇沉淀等方法初步純化蛋白

質(zhì)。

!"#$ 年， %&’(&) 首先提出聚乙二醇（ %*+ ）兩步

沉淀法，分別用終濃度為 ,-./ 和 !0/ 的 %*+ 分步

沉淀，用硫酸銨鹽析法去除 %*+ 。 !"#. 年，在此基

礎上提出了冷乙醇沉淀的改進(jìn)方法，使產(chǎn)量提高，

而且能有效地去除殘留 %*+ 。 !"#! 年 12)(2)(34( 等

提出了硫酸葡聚糖沉淀法 （ 56 法）， %*+ 法和 56

法的產(chǎn)量相當，但提取的 789 制品含有一定量的雜

蛋白。 :;<2 和 6=282>;)) （ !"#? ）用預冷的丙烷和丙

酮（ @0$A ）沉淀蛋白質(zhì)并去除脂質(zhì)，經(jīng) 5*B* 柱層

析進(jìn)一步純化，其 789 抗體活性與用 %&’(&) 法提純

的 789 之間無(wú)明顯差別，且穩定性好，經(jīng) , 次以上

凍融，抗體活性未見(jiàn)改變。 !""0 年 BC3=; 等用水稀

釋法（ D5 ）提純 789 ，每個(gè)卵黃可獲得 !$$>8 以上

的 789 。此后， BC3=; 等比較了 D5 法、 %*+ 法、 56

法和黃原膠法（ E;)=F;) 法）的提純效果，結果表明：

D5 法產(chǎn)量最高，其次為 56 法， D5 法更適合大

規模生產(chǎn)。

!"", 年， G&H3C&(F3 提出了冷乙醇分級離心的

方法，分別用 I$/ 、 ,$/ 、 0./ 的冷乙醇沉淀離心，得

到純度達 ""/ 以上的 789 。此法適用于大規模制備

789 。

工業(yè)上大規模生產(chǎn) 789 的方法有：超臨界二氧

化碳氣體抽提法、卡拉膠法、硫酸銨鹽析法。

. 789 !"#$%&’()*+, 

.-! 789 在動(dòng)物疾病預防方面的應用

研究表明， 789 能抵抗幼齡動(dòng)物腸道中胰蛋白

酶和胰凝乳蛋白酶的消化。故常在幼畜飼料或添加

劑中加入一定量的針對某些特定疾病的 789 ，以使

其獲得有效的被動(dòng)免疫。何月英等利用小鵝瘟強毒

制備的卵黃抗體，對 0J, 日齡雛鵝進(jìn)行預防，其保護

率高達 !$$/ 。楊曉梅等用鴨病毒性肝炎 ! 型雞胚毒

免疫雞，制備的雞抗鴨病毒性肝炎高免卵黃抗體，

經(jīng)實(shí)際應用于預防時(shí)，雛鴨的平均成活率為 "I-"/ 。

.-0 789 在動(dòng)物疾病治療方面的應用

目前，卵黃抗體已被廣泛應用于許多疾病的防

治。汪銘書(shū)應用抗鴨病毒性肝炎（ 5GK ）的卵黃抗體

治療人工感染的鴨時(shí)，當用 ! 萬(wàn)倍 L5.$ 強毒時(shí)保護

率可達到 !$$/ 。張英等用抗小鵝瘟的卵黃抗體治療

發(fā)病鵝群，治愈率為 ".-0/ 。此外，應用多種病原菌

免疫制備的卵黃抗體還可以防治多種病原菌的感

染。詹麗娥等用 7:5 、 M5 和 *56@NI 三聯(lián)高免卵黃抗

體治療上述三種疾病，總有效率可達 ."/ 以上。日本

成功地從雞蛋中提取出能夠殺死幽門(mén)螺旋桿菌的

抗體，并以這種抗體為原料制成了能殺死人體內幽

門(mén)螺旋桿菌的酸奶。

用卵黃抗體治療疾病，安全、高效且無(wú)公害，我

國已有商品化的卵黃抗體供應。

.-, 789 在動(dòng)物疾病診斷方面的應用

卵黃抗體和哺乳動(dòng)物免疫球蛋白有許多不同

之處，如它不與金色葡萄球菌 B 蛋白結合，不與哺乳

動(dòng)物 OP 受體結合，對哺乳動(dòng)物補體無(wú)固定作用等，

這使得卵黃抗體在檢測診斷上具有更強的特異性

和靈敏度，所以卵黃抗體可以應用于免疫熒光試

驗、 *L76B 試驗、免疫擴散、免疫電泳等。鄭厚旌等用

卵黃瓊擴實(shí)驗檢驗卵黃中的 7:5 抗體水平，結果表

明用卵黃瓊擴試驗替代血清瓊擴試驗檢測 7:5 抗體

水平是可行的，并且具有經(jīng)濟、省力、省時(shí)的特點(diǎn)。

此外卵黃抗體有望取代傳統的多克隆抗體的生產(chǎn)，

獲取大量更有效的抗體，同時(shí)也可減少對動(dòng)物的副

反應，提高動(dòng)物的福利。

I 789-./0

789 作為替代抗生素的新型飼料添加劑正在引起人們的關(guān)注， 789 取代抗生素用作生長(cháng)促進(jìn)劑，不會(huì )產(chǎn)生藥物殘留，是一種安全的綠色添加劑。生產(chǎn)技術(shù)較為成熟：用雞卵黃大量生產(chǎn)、制備多克隆抗體是近年來(lái)抗體制備技術(shù)中新興的研究

領(lǐng)域。

789 產(chǎn)量高，價(jià)格低廉。

使用 789 技術(shù)生產(chǎn)免疫球蛋白，可以減少對動(dòng)物的應激，提高動(dòng)物的福利。年齡較大的動(dòng)物會(huì )導致 789 分解失活，然而通過(guò)包埋處理可避免這一問(wèn)題。 6F3>3Q4 等（ !"", ）用脂質(zhì)體包埋 789 ，在 RG0-# 的胃蛋白酶中 ,NA 溫育 !F ，包埋的 789 仍可保存 #$/ 的活性。

綜上所述，雞卵黃免疫球蛋白是一種高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的多克隆抗體，而且雞大規模工業(yè)化飼養成本低，經(jīng)濟方便，同時(shí)制備 789 的工藝相對簡(jiǎn)單。因此，789 在生物制品的開(kāi)發(fā)和疾病的防治方面具有廣闊的前景。應用卵黃抗體防治疾病也有不可避免的缺點(diǎn)，如可能帶有蛋傳染性疾病的病原，對養禽業(yè)存在潛在的威脅。

參考文獻：（略）